期刊简介
本刊创刊于1985年2月。属国家科技部中国科技论文统计源期刊，入编中国学术期刊（光盘版）。以印刷版、光盘版、网络版同时向国内外公开发行。本刊贯彻“注重临床，为临床第一级服务”的办刊宗旨，确保“五湖四海”的办刊思想，主要报道与临床相结合的科研成果，技术革新和学术动态等。
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首页>临床口腔医学杂志
- 杂志名称：临床口腔医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院;中华口腔医学会口腔黏膜病专业委员会;中华医学会武汉分会
- 国际刊号：1003-1634
- 国内刊号：42-1182/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中)
腭裂相关基因MCPR1在大肠杆菌中的融合表达及抗体制备
轩东英；金岩；金明；轩昆；孙强；胡世颉
关键词：MCPR1基因, 原核表达, 融合蛋白, 多克 隆抗体
摘要：目的:MCPR1是我室利用消减杂交技术克隆出来的新基因,本研究利用融合蛋白制备MCPR1的多克隆抗体.方法:采用多聚酶链式反应(PCR)扩增出MCPR1基因蛋白编码序列,进一步将该基因片段克隆到中间载体pGEX-T-e asy,再酶切得到MCPR1片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T-MCPR1 ,在大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,得到GST-MCPR1融合蛋白,进行初步纯化及SDS-PAGE 电泳,直接割胶,将其作为抗原免疫兔子.结果:成功构建融合表达载体pGEX-4T-MCP R1,得到初步纯化的GST-MCPR1融合蛋白,免疫兔子1个月后,获得免疫血清,初步纯化得到多克隆抗体.Western印迹分析表明所得到的抗体具有较强的特异性,ELISA分析证实其效价为106.结论:MCPR1多克隆抗体的获得性为在蛋白水平研究新MCPR1的功能提供了实验基础,后续实验可以利用免疫分析技术研究MCPR1蛋白与其它蛋白质的相互作用,从而为阐明MCPR1在胚胎发育及腭裂形成中所发挥的作用提供实验手段.
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