期刊简介
本刊创刊于1985年2月。属国家科技部中国科技论文统计源期刊，入编中国学术期刊（光盘版）。以印刷版、光盘版、网络版同时向国内外公开发行。本刊贯彻“注重临床，为临床第一级服务”的办刊宗旨，确保“五湖四海”的办刊思想，主要报道与临床相结合的科研成果，技术革新和学术动态等。
往期目录
-
1999
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
-
2019
首页>临床口腔医学杂志
- 杂志名称：临床口腔医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院;中华口腔医学会口腔黏膜病专业委员会;中华医学会武汉分会
- 国际刊号：1003-1634
- 国内刊号：42-1182/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中)
变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因特异片段的克隆和在大肠杆菌中的表达
孙汉堂；吴补领；郭希民；孙叶芳；杨聚才；蒲勤
关键词：变形链球菌, 葡聚糖结合蛋白, 克隆, 原核表达
摘要：目的:克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白C基因(Glucan-binding protein C gene,gbpC)编码序列的特异片段,并在大肠杆菌中实现原核表达.方法:根据gbpC序列设计并合成一对寡核苷酸引物,PCR扩增位于gbpC编码序列1342 bp～1794 bp间的一段特异片段,扩增产物经回收、酶切后,定向插入克隆载体puc18中,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,挑选阳性克隆,鉴定后进行序列测定.将克隆获得的约0.45 kb的gbpC基因特异片段经EcoRI/SalI双酶切后,定向插入pGEX-4T-1中,构建pGEX-4T-1/gbpCE原核融合表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,挑选阳性克隆,酶切及PCR鉴定后,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(Isopropy1-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白GST-GbpCE,SDS-PAGE检测表达产物.结果:测序结果与Sato等报道的序列一致;原核表达后,在SDS-PAGE凝胶上出现一条新生蛋白条带,其相对分子量约43000,与预计大小相符合.结论:成功克隆并表达gbpC特异片段,获得了融合蛋白GST-GbpCE,为制备GbpC抗体打下了基础.
友情链接