期刊简介
本刊创刊于1985年2月。属国家科技部中国科技论文统计源期刊，入编中国学术期刊（光盘版）。以印刷版、光盘版、网络版同时向国内外公开发行。本刊贯彻“注重临床，为临床第一级服务”的办刊宗旨，确保“五湖四海”的办刊思想，主要报道与临床相结合的科研成果，技术革新和学术动态等。
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首页>临床口腔医学杂志
- 杂志名称：临床口腔医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院;中华口腔医学会口腔黏膜病专业委员会;中华医学会武汉分会
- 国际刊号：1003-1634
- 国内刊号：42-1182/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：国家科技部中国科技论文统计源期刊期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 知网收录(中)
pAAV-hBMP2-IRES质粒的构建及病毒包装
程政；王敏；石建峰；时志斌
关键词：人骨形态发生蛋白, 腺相关病毒, 骨组织工程
摘要：目的:构建含人骨形态发生蛋白2(hBMP2)基因的重组腺相关病毒载体.方法:根据hBMP-2基因序列设计引物,上游引入Sal Ⅰ酶切位点,下游引入EcoR Ⅰ酶切位点,以胚胎骨髓组织总RNA为模版进行rt-PCR反应扩增hBMP-2基因.将hBMP-2片段定向亚克隆进pAAV-IRES-GFP的MCS中,获得重组表达质粒(pAAV-hBMP2-IRES-GFP),采用磷酸钙沉淀法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染到AAV 293细胞,进行rAAV-hBMP2-IRES-GFP重组病毒包装.收获的病毒液按氯仿处理、PEG/NaCl沉淀、氯仿反复抽提法浓缩纯化,采用荧光计数法测定重组病毒感染滴度.结果:酶切鉴定、测序结果表明,hBMP2成功克隆入pAAV-IRES-GFP载体中.在AAV 293细胞中包装出重组腺相关病毒载体的感染滴度为3.6×10<'11>/ml.结论:成功制备了rAAV-hBMP2载体,可满足骨组织工程的需要.
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